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凝膠成像儀“切膠”時(shí)要注意什么？
點(diǎn)擊次數(shù)：1916 更新時(shí)間：2021-08-23
凝膠成像儀的凝膠成像系統(tǒng)靈敏度越來(lái)越高，自動(dòng)化程度也更高，設(shè)計(jì)也更加人性化，逐漸變得像傻瓜照相機(jī)一般易用。另外，外型也更加小巧、時(shí)尚。凝膠成像系統(tǒng)的基本骨架是CCD照相機(jī)、暗室和分析軟件。不過(guò)其功能不僅僅限于對(duì)瓊脂糖凝膠進(jìn)行成像，現(xiàn)在的成像儀趨向于多功能化，還適用于蛋白膠、發(fā)熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應(yīng)用。
凝膠成像儀切膠操作時(shí)的注意事項(xiàng)如下：
1.電泳的buffer和gel都是新制的，切膠的臺(tái)子清理干凈，刀片需要洗凈，總之一句話就是保證切下的帶沒(méi)有外源DNA污染。
2.切膠是要把整個(gè)目的片斷所在位置的膠全部回收。為了減少膠的體積，可以用相對(duì)比較薄的膠來(lái)做，只要夠點(diǎn)樣即可，也可采用薄而寬的梳子來(lái)跑膠。
3.關(guān)于防護(hù)，在一般有機(jī)玻璃后就足夠了，戴上防護(hù)面具以保護(hù)眼睛，如果戴樹(shù)脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者對(duì)于膠有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用點(diǎn)marker和帶刻度的尺子一起照相的方法來(lái)確定目的條帶在膠上的位置進(jìn)行切膠。
4.按照正常程序點(diǎn)marker跑膠，然后切下有marker的膠，EB染色，紫外燈下與帶刻度的尺子一起照相。由于要回收的帶與marker間的相對(duì)位置已知，根據(jù)尺子來(lái)衡量未染色膠上目的帶的位置即可。如果覺(jué)得很難判斷，可以直接在marker邊點(diǎn)少量的樣，這樣位置就容易確定了。
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